当把犬暴露于带有强至病性的犬瘟病毒喷雾剂中后,有50%的犬死亡。死亡的犬没有抗体产生,然而性存下来的犬第九天才产生抗体。通过荧光抗体检测特定的组织。犬跟病毒接触以后,刚开始病毒仅存在支气管淋巴结和扁桃体中。在第2到第3天血液中发现有病毒存在,但是仅存在于单核细胞中。刚开始的6天病毒在淋巴系统中繁殖而不是在上皮细胞中。从第6到第9天单核细胞中的病毒散布到全身,那些没有产生抗体的犬,病毒广泛的侵入到所有上皮组织。当上皮组织受感染后,相应的临床症状出现,如:厌食、腹泻、结膜炎、肢体末端抽搐等等。而那些产生抗体并存活下来的犬被证明病毒消失,除了少数犬,病毒存在于神经系统和足垫上皮细胞中。尽管有抗体的存在,病毒有保留于大脑及足垫的能力可以解释康复犬的特定的中枢神经系统症状和硬足垫症。
犬瘟病毒是在1905年由Carre表示的,他认识到病毒的自然接触传染并报道那是由病毒引起的,当时由病毒引起的犬瘟受到争论,有几种病原菌受到怀疑,直到Dunkin 和Laidlaw在控制的条件培养狗后病毒才被确定。他们发现雪豹易受感染,因此制定了一个能够示范和滴定犬瘟病毒的动物实验,后来这种雪豹的应用被组织培养技术所取代,对狗和学报应用常规的病理学方法,提供了关于犬瘟的有用的信息。但是精确的病毒的分布是直到荧光抗体技术被应用后才确定的。应用荧光抗体技术,在雪豹身上而不是狗身上做了一系列的实验,目的是研究与犬瘟发病机制有关的病毒分布,这和犬瘟在雪豹上的发病机制是不同的。
材料和方法
犬—兽医病毒研究机构单纯饲养的SPF比格犬,和一部分从附近农场获得的易感小狗,这些狗的年龄从6周到6个月。实验开始前,这些狗都是隔离饲养,给以商业狗食和无菌水。
病毒—标有St.Joseph strain的犬瘟病毒毒株被获得。这种毒株是通过SPF比格犬传代维持的。通过静脉接种后5到6天采集狗的脾脏。部分脾脏在零下70度冰冻保存。实验前一小部分通过在199媒介中沉淀以获得10%的组织浓度,悬浮液以1500转离心10分钟,收集上层液。通过实验确定上层液中无细菌及支原体。
注射途径—在中等大小的房间里,暴露于喷雾剂中30分钟…
荧光抗体的准备—高免血清是在SPF比格犬上按如下方式制备的:首先,对比格犬皮下注射10ml 0.2%的福尔马林灭活的病毒组织液,该组织液由10%脾脏组织上层液取得